REPOZITORIJ > REZULTATI

Povzetek

Fosforilacija proteinov je pomembna posttranslacijska modifikacija pri prenosu celičnih signalov. Motnje v tem mehanizmu lahko povzročijo fenotipske nepravilnosti pri zdravih organizmih. Legumain, znan tudi kot asparagin-specifična endopeptidaza, je cisteinska proteinaza, ki se nahaja v rastlinah in živalih. Legumain uravnava renalno in hematopoetsko homeostazo ter sodeluje pri imunskem odzivu organizma na patogene. Spremembe v njegovem delovanju so povezane z različnimi malignimi obolenji in nevrološkimi motnjami. Miši z izbitim genom za legumain imajo normalen fenotip, z izjemo oslabljene funkcije ledvic, hemofagocitnega sindroma in ekstramedularne hematopoeze. V tem delu smo preučevali spremembe v fosforilaciji proteinov pri miših z izbitim genom za legumain v primerjavi s kontrolami divjega tipa, da bi bolje razumeli, kako odsotnost legumaina vpliva na fosforilacijo proteinov in povezano celično signaliziranje. Fosfopeptidi iz ledvičnih in jetrnih tkiv so bili obogateni in analizirani z masno spektrometrijo, nato pa preverjeni s prenosom western in imunohistokemijo. Indentificirali smo več forsforiliranih mest. Med njimi so bila, Y-box vezavnem proteinu 1, ki veže RNA in DNA, odkrita tri fosforilirana mesta. Pri miših z izbitim genom za legumain in pri človeškem modelu, celični liniji HL-60, identificirano fosforilirano mesto na serinu 100 proteina Y-box aktivira NF-κB signalno pot, kar vodi v povečan vnetni odziv. To je bilo potrjeno s povečano ekspresijo NF-κB genov in njegovih tarč. To delo osvetljuje vlogo legumaina pri miših in njegovo vlogo pri celičnih in sistemskih procesih.